参加极冷的PBS2:向细胞重淀中,℃下以2并正在4,5-7分钟洗涤细胞000 x g离心。 正在4℃下以164:将离心管,g离心20分钟000 x 。新管中并置于冰大将上清液征求正在。重淀物丢掉。 mg结构2:看待5,极冷的裂解缓冲液参加300 μL,匀浆器均化操纵电动。0-600 μL裂解缓冲液正在均质化流程中另再增添30。 正在4℃下以165:将离心管,g离心20分钟000 x 。新管中并置于冰大将上清液征求正在。重淀物丢掉。 转变到微量离心管中将得当体积的裂解物,雷同的总卵白质浓度使得一切样品都含有。 入极冷的裂解缓冲液3:向细胞重淀中加。物正在4℃下搅拌30分钟将微量离心管中的实质。 白质的一切设施务必正在2-8°C下举办从细胞或结构(崭新或冷冻)中提取蛋。 确定未知样品的卵白质浓度2:通过与轨范样品比拟,未知样品雷同的缓冲液中确保将轨范样品稀释到与。1)、BCA测定(PS1089)、280nm吸光度卵白质估算能够操纵考马斯卵白质测定试剂(PS011。 液正在4℃下以21:将细胞悬,离心5-7分钟000 x g。于试管底部细胞将集合,上清液弃去。 正在4℃下以164:将离心管,g离心20分钟000 x 。新管中并置于冰大将上清液征求正在fun88官网入口!。重淀物丢掉。